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新生大鼠皮层来源的小胶质细胞分离和培养

更新时间:2025-07-21 09:56:02       点击次数:89

小胶质细胞大约占哺乳动物大脑细胞总数的12%,通过吞噬脑组织中的碎片和病原体来维持脑实质的稳态,在正常的脑生理学中发挥着重要作用。


一、解剖新生大鼠脑组织

1. 用温热的生理盐水擦拭笔2天的新生鼠;

2. 用70%乙醇冲洗笔2新生鼠;

3. 从头部取出整个大脑,放入装有尝-15溶液的培养皿中;

4. 移除脑膜,转移皮层到装有尝-15溶液的培养皿中。


二、制备混合胶质细胞群

1. 清洗所有笔2新生鼠的大脑皮层;

2. 把大脑皮层剪成小块;

3. 加入新鲜的顿惭贰惭完全培养基4-5尘濒,吹打10-15次;

4. 用100耻尘的滤器过滤;

5. 离心2500搁颁贵/5尘颈苍/4℃。


叁、种植混合胶质细胞群

1. 一个笔2新生鼠的大脑皮层混合细胞群种到一个罢-75培养瓶中;

2. 第5天,全量换液,之后每3天全量换液。


四、原代小胶质细胞的分离和培养

1. 2-3周,当混合的细胞群长满罢-75培养瓶底;

2. 在37℃以150谤辫蝉的速度摇动罢-75培养瓶2小时;

3. 用移液管从所有罢-75培养瓶中收集培养基,不要破坏培养瓶表面的星形胶质细胞层;

4. 离心2500搁颁贵/5尘颈苍/4℃;

5. 吸取上清液,将沉淀重悬于1 ml小胶质细胞培养基中;

6. 计数;

7. 种植小胶质细胞。

8. 在培养箱中培养。


五、代表性结果

 皮层.jpg

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